Page 61 - girbes

aminoácidos determinada por análisis de masas MALDI-TOF de péptidos trípticos. Los
residuos clave de los sitios de fijación de azúcares se marcan con asteriscos y la tirosina
en el dominio 2? están marcados por una estrella hueca. Los sitios de glicosilación están
marcados por una línea gruesa. Los números de la izquierda se refieren a los precursores
mientras que los de la derecha se refieren a las cadenas B de SELlm, SELld, ebulina l y
ricina. (adaptada de Citores y cols., 2008).

ASPECTOS MOLECULARES DE LA INTERNALIZACIÓN Y DEL
TRÁFICO INTRACELULAR DE RICINA.

Los receptores de la ricina en la membrana plasmática son de dos tipos,
glicanos de galactosa/galactosamina terminales y glicanos de manosa
terminal. La unión de ricina a estos receptores determina la cantidad de
toxina que es derivada a la degradación lisosómica. Los primeros
experimentos realizados para determinar los procesos moleculares
asociados a la internalización de la ricina indicaron que esta se producía vía
vesículas recubiertas de clatrina dependientes de la dinamina que es una
proteína con actividad GTPasa que se requiere para la invaginación de
dichas vesículas desde la membrana plasmática (Van Deurs, y cols., 1985).
Posteriormente se descubrió que la internalización de ricina se producía
también por una vía independiente de clatrina (Spooner y Lord, 2015).

Las células que expresan la molécula de dinamina normal son sensibles a la
internalización de transferrina y de toxina diftérica y a la intoxicación por
ricina, mientras que las que expresan una mutación dominante negativa de
dinamina pierden la capacidad de internalización de transferrina y la
internalización y toxicidad de la toxina diftérica, pero no la toxicidad de la
ricina (Simpson y cols., 1998; Spooner y Lord, 2015). Ello claramente
indica que la ricina se internaliza por dos vías, una dependiente de clatrina
y otra independiente de ella.

Los estudios más importantes se han realizado en levaduras y células
humanas (Sowa-Rogozinska y cols., 2019). En levaduras se necesita el
complejo formado por las proteínas Syn8p y Snc1p para la captación de
proteínas en forma de vesículas y su transporte al endosoma (Becker y
cols., 2016). La fusión de las vesículas de los endosomas tempranos con el
aparato de Golgi requiere el complejo de las proteínas Sso1p y Snc2p
(Lewis y cols., 2002).

Después de la endocitosis la ricina contenida en las vesículas se dirige a los
endosomas tempranos. Se ha calculado que la mayor parte de ricina
captada (aprox. 95%) es reciclada a la membrana plasmática en forma
intacta, un aparte es degradada en el lisosoma y el resto es canalizada al
aparato de Golgi (Battelli y cols., 2004). La mayor parte de la ricina

59